保存条件：Buffer A和B：2-8℃，Buffer C：-20℃。也可整体-20℃长期保存。

规格：50 assays   

主要组成成分

注意事项

1．实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须方-20℃冰箱预冷。

2．所有样品操作请置于冰上进行。

产品简介

细胞和动物组织核/浆蛋白抽提试剂盒试剂盒能够简单、快速的提取来源于哺乳动物细胞及组织的细胞核和细胞浆蛋白，所提取蛋白保持生物学活性。本试剂盒首先通过细胞浆蛋白抽提试剂裂解细胞膜，释放细胞浆蛋白，然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过细胞核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。抽提获得的核蛋白及浆蛋白纯度高，有效避免核/浆蛋白的交叉污染，可以用于Western、Gel Shift、报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。

操作步骤

I 细胞中胞浆、胞核蛋白的提取

1．取5-10*106个细胞，在4℃，500xg条件下离心2-3分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。

2.用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

3.用20ul细胞压积中加入200ul冷的Buffer A，2ul Buffer C，高速涡旋震荡15秒，置冰上10分钟。

4.再次高速涡旋振荡5秒，然后在4℃，16000xg条件下离心5分钟。

5.快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白， -80℃冰箱保存备用。

6.在沉淀中加入200ul冷的Buffer B，2ul Buffer C，高速涡旋震荡15秒。

7.置冰上40分钟，每隔10分钟高速涡旋振荡15秒。

8.在4℃，16000xg条件下离心10分钟。

9.快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白， -80℃冰箱保存备用。

II 组织中胞浆、胞核蛋白的提取

1．取适量组织样本剪碎，加冷PBS，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体（或用液氮研磨），冰上静置5分钟，小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。

2.在4℃，500xg条件下离心2-3分钟，弃上清。

3.按照”I 细胞中胞浆、胞核蛋白的提取方法”的第3步骤往下操作即可。

上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用。

     说明书：细胞和动物组织核/浆蛋白抽提试剂盒