昆虫细胞蛋白表达服务；-蛋白定制服务-北京诺梵生物科技有限公司

蛋白定制服务

昆虫细胞蛋白表达服务；

杆状病毒表达载体系统（baculovirus expression vector system，BEVS）是当今基因工程四大表达系统之一。BEVS属于真核表达系统，通过BEVS得到的重组病毒易于筛选、具有翻译后修饰功能、表达外源基因的效率较高。BEVS还可以同时表达多个外源基因，在分泌蛋白生物活性的同时增加产量。因此，BEVS在科研和工业生产中通常应用于大规模重组蛋白的制备。

实验流程

实验步骤	实验内容
密码子优化及基因合成	分析基因序列，优化密码子，合成目的基因，提供载体
重组质粒构建	构建含有目的基因的载体质粒
重组杆状病毒载体构建	将目的基因亚克隆到合适的杆状病毒转移载体上
重组杆状病毒扩大培养	转染昆虫细胞，制备病毒贮液，空斑实验测定病毒滴度
表达条件优化	检测并优化表达条件（细胞株、MOI、时间温度等）
大规模杆状病毒昆虫细胞培养	根据优化条件，可提供大规模细胞培养
蛋白分析和纯化	通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。通过Western-blot验证目标蛋白正确性。通过亲和层析，离子交换，疏水及凝胶过滤等方法纯化表达的重组蛋白。去除不需要的纯化标签。

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